> ព័ត៌មាន > ព័ត៌មានឧស្សាហកម្ម

ហេតុអ្វីវប្បធម៌កោសិកា lyse កោសិកាឈាមក្រហមដំបូង?

2022-12-23

ការណែនាំជាមូលដ្ឋាន
Erythrocyte lysate គឺជាវិធីសាស្រ្តដ៏សាមញ្ញ និងងាយស្រួលបំផុតមួយក្នុងការយកកោសិកាឈាមក្រហមចេញ ពោលគឺបំបែកកោសិកាឈាមក្រហមជាមួយ lysate ដែលមិនបំផ្លាញកោសិកា nucleated និងអាចយកកោសិកាឈាមក្រហមចេញបានពេញលេញ។ Lysate cleavage គឺជាវិធីសាស្ត្រកម្ចាត់កោសិកាឈាមក្រហមកម្រិតស្រាល ដែលត្រូវបានប្រើជាចម្បងសម្រាប់ការបំបែក និងការបន្សុតកោសិកាជាលិកាដែលបែកខ្ញែកដោយការរំលាយអាហារអង់ស៊ីម ការបំបែក និងការបន្សុតនៃ lymphocytes និងការយកចេញនៃកោសិកាឈាមក្រហមនៅក្នុងការពិសោធន៍នៃប្រូតេអ៊ីនជាលិកា និង nucleic ។ ការទាញយកអាស៊ីត។ កោសិកាជាលិកាដែលទទួលបានដោយ lysate នៃកោសិកាឈាមក្រហមមិនមានកោសិកាឈាមក្រហមទេ ហើយអាចប្រើប្រាស់បន្ថែមទៀតសម្រាប់វប្បធម៌បឋម ការលាយកោសិកា លំហូរ cytometry ការបំបែក និងការទាញយកអាស៊ីត nucleic និងប្រូតេអ៊ីន។ល។

ការណែនាំសម្រាប់ការប្រើប្រាស់
គំរូកោសិកាជាលិកា
1. ជាលិកាស្រស់ត្រូវបានរំលាយដោយលំពែង/អង់ស៊ីម ឬ collagenase ហើយបំបែកទៅជាកោសិកាតែមួយ ហើយសារធាតុ supernatant ត្រូវបានបោះចោលដោយ centrifugation ។

2. យក ELS lysate ពីទូរទឹកកកនៅសីតុណ្ហភាព 4â¹۔ បន្ថែម ELS lysate ទៅក្នុង cell precipitate ក្នុងសមាមាត្រ 1:3-5 (បន្ថែម 3-5ml នៃ lysate ទៅ 1ml នៃ cell បង្រួម) ផ្លុំ និងលាយថ្នមៗ។

3. Centrifuge នៅ 800-1000rpm រយៈពេល 5-8 នាទី ហើយបោះចោលរាវពណ៌ក្រហមខាងលើ។

4. ផ្នែកដែលទឹកភ្លៀងត្រូវបានប្រមូល និង centrifuged ជាមួយនឹងដំណោះស្រាយរបស់ Hank ឬដំណោះស្រាយវប្បធម៌គ្មានសេរ៉ូម 2-3 ដង។

5, ប្រសិនបើការបំបែកមិនពេញលេញ / ពេញលេញអាចត្រូវបានធ្វើម្តងទៀតជំហាន 2 និង 3 ។

6. កោសិកា Resuspension សម្រាប់ការពិសោធន៍ជាបន្តបន្ទាប់; ប្រសិនបើ RNA ត្រូវបានស្រង់ចេញ វាជាការល្អបំផុតក្នុងការធ្វើដូច្នេះនៅក្នុងដំណោះស្រាយដែលបានរៀបចំពីជំហានទី 4 ដោយប្រើទឹក DEPC

កោសិកាឈាមក្រហមមានវដ្តជីវិតខ្លីណាស់ គឺត្រឹមតែ 120 ថ្ងៃប៉ុណ្ណោះ ប៉ុន្តែពួកវាបង្កើតឈាមឡើងវិញបានយ៉ាងលឿន ហើយក្នុងករណីនេះ ពួកវាមានសមត្ថភាពពិសេសក្នុងការបែងចែកកោសិកា ហើយវាជាកោសិកាបំបែកលឿនបំផុតទាំងអស់ ដូច្នេះកោសិកានេះមានតម្លៃខ្លាំងណាស់។ ដូច្នេះវាមានប្រយោជន៍ខ្លាំងណាស់សម្រាប់វប្បធម៌កោសិកា។ វាសាមញ្ញណាស់ វាមិនមានសារពាង្គកាយណាមួយនៅក្នុងវាទេ មានតែភ្នាសកោសិកា និងប្រូតេអ៊ីនប៉ុណ្ណោះ។

មុន:តើ ELISA Kit មានមុខងារអ្វីខ្លះ?

បន្ទាប់:តម្រូវការសារធាតុ Reagent និងតំណាងជាមូលដ្ឋាននៃការប្រមូលផ្តុំដំណោះស្រាយ។